Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-203 (m): sc-421032

Présentation

Ifi203 code IFI-203, une protéine murine induite par l’interféron, impliquée dans la surveillance immunitaire innée et la régulation de programmes géniques inflammatoires. IFI-203 est fréquemment étudiée dans le contexte des réponses stimulées par l’interféron, où elle peut influencer la détection des acides nucléiques, le contrôle transcriptionnel et la signalisation cytokiniques en aval. Une régulation altérée des voies de l’interféron est pertinente dans des modèles d’auto-immunité, d’inflammation chronique et d’interactions hôte–pathogène, ce qui fait d’Ifi203 un locus utile pour disséquer les circuits immunitaires intrinsèques à la cellule. Des perturbations d’Ifi203 par perte ou gain de fonction peuvent aider à préciser comment les programmes induits par l’interféron façonnent les états d’activation des cellules immunitaires et les phénotypes inflammatoires tissulaires chez la souris.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-203 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ifi203 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ifi203, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ifi203 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IFI-203.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ifi203 pour l'étude de la signalisation de IFI-203, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Ifi203 essentiels à la fonction de IFI-203
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ifi203 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le IFI-203 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le IFI-203 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ifi203. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le IFI-203 plasmide HDR (m) et le IFI-203 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ifi203 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ifi203 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.