Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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I1PP2A Plasmide Double Nickase (h): sc-402988-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ANP32A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ANP32A Double Nickase Plasmid (h) e il ANP32A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ANP32A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ANP32A Antibody (A-182): sc-100767
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
I1PP2A Plasmide Double Nickase (h) | sc-402988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ANP32A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANP32A codifica I1PP2A, una fosfoproteina nucleare acida ricca in leucina che agisce come inibitore della fosfatasi proteica 2A (PP2A) e come regolatore di processi associati alla cromatina. Modulando eventi di defosforilazione dipendenti da PP2A, I1PP2A influenza la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno al DNA e nodi di segnalazione che integrano il controllo trascrizionale con l'adattamento cellulare allo stress. ANP32A partecipa inoltre al metabolismo dell'mRNA e alle dinamiche nucleo-citoplasmatiche attraverso interazioni con fattori leganti l'RNA e con fattori di rimodellamento della cromatina. Un'attività deregolata di ANP32A/I1PP2A è stata collegata in letteratura a fenotipi di proliferazione e sopravvivenza alterati, a supporto della sua rilevanza per studi sulla segnalazione oncogenica e su vie neurodegenerative.
ANP32A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ANP32A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ANP32A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ANP32A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ANP32A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.