HSPA1L Plasmide Double Nickase (h): sc-400479-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSPA1L Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSPA1L Double Nickase Plasmid (h) e il HSPA1L Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HSPA1L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HSPA1L Antibody (C-6): sc-393297
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSPA1L Plasmide Double Nickase (h) | sc-400479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSPA1L Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA1L codifica un membro inducibile dallo stress della famiglia di chaperoni HSP70, che sostiene l’omeostasi proteica legando polipeptidi non ripiegati e coordinandone il ripiegamento, il traffico intracellulare o l’instradamento verso la degradazione. HSPA1L partecipa alle reti cellulari di proteostasi, inclusi la segnalazione della risposta allo shock termico, i cicli ATPasici regolati da co-chaperoni e il crosstalk con le vie ubiquitina–proteasoma e dell’autofagia durante lo stress proteotossico. Modulando la capacità di ripiegamento proteico e la resilienza allo stress, HSPA1L è rilevante in contesti in cui l’equilibrio dei chaperoni influenza la sopravvivenza cellulare, la differenziazione e la biologia immunitaria o riproduttiva. Un’attività chaperonica deregolata è stata associata a una tolleranza allo stress alterata e a meccanismi di controllo qualità delle proteine legati a malattie, rendendo HSPA1L un bersaglio utile per studi meccanicistici della proteostasi.
HSPA1L Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HSPA1L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HSPA1L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HSPA1L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HSPA1L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.