HoxC9 Plasmide Double Nickase (h): sc-404568-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxC9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxC9 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxC9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXC9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxC9 Antibody (HOXCA6E6): sc-81100
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxC9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404568-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxC9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404568-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXC9 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxC9, un regolatore a legame specifico con il DNA che contribuisce a definire l’asse antero‑posteriore durante l’embriogenesi e guida i programmi di differenziamento neurale e mesodermico. Nelle cellule umane, HoxC9 influenza lo stato della cromatina e le reti trascrizionali che controllano la specificazione di linea, la maturazione neuronale e l’identità regionale attraverso i circuiti regolatori del cluster HOX e complessi trascrizionali dipendenti da cofattori. Un’espressione deregolata di HOXC9 è stata riportata in molteplici contesti tumorali, nei quali programmi genici guidati da HOX alterati possono influenzare proliferazione, migrazione e stati di differenziamento. In quanto regolatore dello sviluppo con associazioni oncogeniche o oncosoppressive dipendenti dal contesto, HOXC9 è spesso studiato per il suo ruolo nelle transizioni del destino cellulare e nel rimodellamento trascrizionale rilevante per la malattia.
HoxC9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXC9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXC9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXC9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXC9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.