Plásmido Doble Nickase (h) HoxC9: sc-404568-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxC9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxC9 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxC9 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXC9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HoxC9 Anticuerpo (HOXCA6E6): sc-81100
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxC9 | sc-404568-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxC9 | sc-404568-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXC9 codifica el factor de transcripción homeobox HoxC9, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que establece el patrón del eje anteroposterior durante la embriogénesis y dirige programas de diferenciación neural y mesodérmica. En células humanas, HoxC9 influye en el estado de la cromatina y en redes transcripcionales que controlan la especificación de linaje, la maduración neuronal y la identidad regional, a través de la circuitería reguladora del clúster HOX y de complejos transcripcionales dependientes de cofactores. Se ha informado de una expresión desregulada de HOXC9 en múltiples contextos tumorales, donde programas génicos alterados impulsados por HOX pueden afectar la proliferación, la migración y los estados de diferenciación. Como regulador del desarrollo con asociaciones oncogénicas o supresoras de tumores dependientes del contexto, HOXC9 se estudia con frecuencia por su papel en transiciones del destino celular y en la remodelación transcripcional relevante para enfermedades.
HoxC9 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXC9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXC9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXC9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXC9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.