HoxB9 Plasmide Double Nickase (h): sc-401770-NIC

HOXB9 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxB9, un regolatore legante il DNA che contribuisce a stabilire la patterning antero-posteriore e l’identità dei tessuti durante l’embriogenesi. Nelle cellule umane, HoxB9 influenza la specificazione di linea e i programmi di differenziamento modulando reti trascrizionali legate alla morfogenesi, al controllo del ciclo cellulare e alla plasticità epitelio-mesenchimale. Un’espressione deregolata di HOXB9 è stata associata a stati trascrizionali oncogenici in diversi contesti tumorali, includendo effetti su firme geniche angiogeniche e invasive; inoltre, è oggetto di studio anche nei disturbi dello sviluppo che comportano un’alterazione della patterning. In quanto nodo all’interno dei circuiti regolatori dei geni homeobox, HoxB9 è rilevante per analizzare le reti geniche dello sviluppo e il controllo trascrizionale del destino cellulare.

HoxB9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXB9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXB9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXB9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXB9 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.