Hoechst 33342 trihydrochloride (CAS 23491-52-3)

L'Hoechst 33342 triidrato è un fluorocromo ampiamente utilizzato per visualizzare il DNA cellulare, fornendo preziose informazioni sulla sua struttura e funzione. Questo ligando del solco minore del DNA specifico per A:T ha molteplici funzioni nella ricerca. Facilita l'identificazione e la quantificazione di componenti cellulari come proteine e lipidi. Inoltre, trova utilità nelle applicazioni di somministrazione di farmaci, consentendo la consegna mirata a cellule o tessuti specifici. L'eccitazione del colorante avviene a circa 350 nm, con un massimo di emissione intorno ai 461 nm. Rispetto ad altri coloranti Hoechst, Hoechst-33342 possiede una maggiore lipofilia grazie a un gruppo etilico aggiuntivo. Spiazza diversi intercalatori noti del DNA e può interrompere la captazione del colorante DNA in combinazione con l'adriamicina (sc-200923). Questo composto viene utilizzato per vari scopi, tra cui lo smistamento di cellule vive in base al contenuto di DNA mediante FACS, la visualizzazione della distribuzione della cromatina in cellule vive, la rilevazione dell'incorporazione di BrdU e l'esame di cellule fissate al microscopio. Inoltre, svolge un ruolo nello studio delle fasi iniziali dell'apoptosi e della distribuzione del ciclo cellulare. In particolare, Hoechst-33342 ha effetti diversi su diversi tipi di cellule. Induce la differenziazione cellulare, si lega reversibilmente alle cellule eritroleucemiche Friend, inibisce la Topo I (topoisomerasi I), induce l'apoptosi nelle cellule HL-60, regola l'efflusso di Ca2+ e influenza la differenziazione cellulare nelle cellule del reticolo sarcoplasmatico giunzionale. Hoechst 33342 triidrato interagisce con il DNA attraverso un legame non covalente, formando un complesso fluorescente. Il colorante si lega specificamente al solco minore del DNA a doppio filamento, provocando un quenching della fluorescenza al momento del legame. Sebbene possa legarsi sia al DNA a singolo che a doppio filamento, la sua affinità è maggiore per quest'ultimo. Sebbene Hoechst 33342 possa legarsi anche all'RNA, la sua affinità di legame per l'RNA è inferiore rispetto al DNA.