HLA-DP β1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401413-NIC

HLA-DPB1はHLA-DPのβ1鎖をコードしており、HLA-DPA1と対になって、プロフェッショナルな抗原提示細胞上でHLA-DPのヘテロ二量体型MHCクラスII受容体を形成します。この複合体は外来性のペプチド抗原を結合してCD4+ T細胞に提示し、抗原のプロセシングおよび提示経路を介して、獲得免疫の活性化、免疫寛容、ならびにサイトカイン極性化を規定します。HLA-DPの発現は、CIITAによるMHC II誘導を含むインターフェロンγ応答性の転写プログラムによって制御されており、炎症性シグナルや免疫細胞分化と結び付いています。HLA-DPB1の遺伝的多様性や発現制御の破綻は、同種免疫認識の変化や免疫介在性疾患への感受性と関連することが報告されており、抗原提示機構およびT細胞応答のメカニズム研究を支持します。

HLA-DP β1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HLA-DPB1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HLA-DPB1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HLA-DPB1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HLA-DPB1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。