Histone Deacetylase 11 (HDAC11) Particelle di Attivazione Lentivirale (h): sc-402103-LAC

HDAC11 codifica l’istone deacetilasi 11, l’unica deacetilasi istonica di classe IV, che regola l’accessibilità della cromatina e i programmi trascrizionali attraverso la deacilazione delle lisine, includendo attività di deacetilazione e di rimozione di gruppi acili a catena lunga (defatty-acylation). Modellando gli stati epigenetici, HDAC11 influenza la differenziazione delle cellule immunitarie e la segnalazione infiammatoria, con effetti su vie che controllano l’espressione delle citochine, la presentazione dell’antigene e l’adattamento metabolico. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di HDAC11 sono state associate a risposte immunitarie disregolate e a stati trascrizionali oncogenici, sostenendo l’interesse di studio in immunologia, biologia ematologica ed epigenetica tumorale. Queste funzioni rendono HDAC11 un nodo utile per indagare come gli enzimi epigenetici coordinino reti di espressione genica che governano proliferazione, differenziamento e risposte allo stress.

Le particelle di attivazione lentivirale Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di HDAC11 in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione HDAC11, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di Histone Deacetylase 11 (HDAC11). L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo HDAC11 e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.