Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Particelle di Attivazione Lentivirale (m): sc-436647-LAC

Il gene murino **Hdac1** codifica l’istone deacetilasi 1 (HDAC1), una HDAC di classe I che rimuove gruppi acetile dai residui di lisina sugli istoni e su altri substrati nucleari, regolando l’accessibilità della cromatina e i programmi trascrizionali. HDAC1 opera in complessi multiproteici corepressori, tra cui SIN3, NuRD e CoREST, risultando così collegata al controllo del ciclo cellulare, alle risposte al danno al DNA e alla differenziazione specifica di linea. Attraverso l’accoppiamento con fattori di trascrizione e rimodellatori della cromatina, HDAC1 modella stati epigenetici che influenzano proliferazione, apoptosi ed espressione genica durante lo sviluppo. Un’attività di HDAC1 deregolata è spesso studiata in contesti di repressione trascrizionale oncogenica, fenotipi del neurosviluppo e stati di attivazione delle cellule immunitarie, rendendola un nodo centrale per i meccanismi di malattia guidati dall’epigenetica nei modelli murini.

Le particelle di attivazione lentivirale Histone Deacetylase 1 (HDAC1) (m) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di Hdac1 in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale Histone Deacetylase 1 (HDAC1) (m) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione Hdac1, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di Histone Deacetylase 1 (HDAC1). L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo Hdac1 e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.