Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HIC-1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402118-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HIC-1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HIC-1 Double Nickase Plasmid (h) e il HIC-1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HIC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HIC-1 Antibody (H-6): sc-271499
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HIC-1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402118-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HIC-1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402118-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIC1 (hypermethylated in cancer 1) umano codifica HIC-1, un repressore trascrizionale dotato di domini BTB/POZ e di dita di zinco C2H2, che limita i programmi di espressione genica associati a proliferazione, risposte al danno del DNA e differenziamento cellulare. HIC-1 partecipa alla repressione mediata dalla cromatina tramite il reclutamento di co-repressori, collegandosi alla segnalazione di stress associata a p53 e al controllo epigenetico della trascrizione. La perdita dell’attività di HIC1 è frequentemente associata a ipermetilazione del promotore e a reti trascrizionali alterate che sostengono fenotipi oncogenici. In quanto hub regolatorio, HIC-1 è studiato per la sua influenza sui checkpoint del ciclo cellulare, sui bersagli trascrizionali legati all’apoptosi e sul controllo, dipendente dal contesto, dell’espressione genica durante lo sviluppo.
HIC-1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HIC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HIC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HIC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HIC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.