HAPLN1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419816

개요

Hapln1은 히알루로난 및 프로테오글리칸 연결 단백질 1(HAPLN1)을 암호화하며, HAPLN1은 히알루로난–프로테오글리칸 응집체를 안정화하고 세포 주변(pericellular) 기질의 구조적 조직화를 지지하는 세포외기질(ECM) 구성 요소입니다. HAPLN1은 히알루로난과 콘드로이틴 황산 프로테오글리칸 사이의 상호작용을 강화함으로써 연골과 결합조직의 무결성에 기여하고, 세포 부착, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 기질 의존적 신호전달에 영향을 줍니다. 또한 그 활성은 조직 발달, 염증, 섬유화를 조절하는 경로와 맞물리는 ECM 조립 및 재형성 과정과 밀접하게 연관되어 있습니다. HAPLN1과 관련된 기질 구조가 조절 이상을 보이면 퇴행성 관절 표현형 및 더 광범위한 기질(스트로마) 변화와 연관될 수 있으며, 이는 세포 이동과 조직 항상성 조절에도 영향을 미칠 수 있습니다.

HAPLN1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Hapln1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Hapln1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Hapln1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HAPLN1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HAPLN1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Hapln1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HAPLN1 기능에 중요한 Hapln1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Hapln1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HAPLN1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 HAPLN1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Hapln1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HAPLN1 HDR 플라스미드 (m) 및 HAPLN1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Hapln1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Hapln1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.