GSTM1 Plasmide Double Nickase (h): sc-418201-NIC

Il gene umano **GSTM1** codifica per la **glutatione S-transferasi mu 1**, un enzima di detossificazione di fase II che catalizza la coniugazione del glutatione con xenobiotici elettrofili e metaboliti reattivi endogeni. Limitando lo stress ossidativo e gli addotti derivati dalla perossidazione lipidica, GSTM1 contribuisce all’omeostasi redox e alle vie di difesa cellulare che interagiscono con le risposte antiossidanti regolate da **NRF2**. La perdita genetica o la ridotta attività di GSTM1 è stata associata a differenze interindividuali nella suscettibilità alle sostanze chimiche e nella segnalazione infiammatoria, ed è spesso studiata nel contesto del metabolismo dei cancerogeni e del danno ossidativo nella biologia delle vie aeree e del fegato. Una funzione alterata di GSTM1 è inoltre rilevante nella ricerca sulle risposte all’esposizione ambientale e sulla variabilità del metabolismo dei farmaci nelle cellule umane.

GSTM1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GSTM1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GSTM1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GSTM1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GSTM1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.