Grx2 Plasmide Double Nickase (h): sc-412093-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Grx2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Grx2 Double Nickase Plasmid (h) e il Grx2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GLRX2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Grx2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412093-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GLRX2** codifica la glutarredossina-2 (Grx2), un’ossidoreduttasi tiolo–disolfuro che utilizza il glutatione per catalizzare la deglutationilazione proteica reversibile e mantenere l’omeostasi redox mitocondriale e citosolica. Grx2 modula la gestione delle specie reattive dell’ossigeno, sostiene l’integrità dei mitocondri e influenza processi sensibili allo stato redox, tra cui l’apoptosi, la biogenesi dei cluster ferro–zolfo e l’attività degli enzimi metabolici. Attraverso queste funzioni, GLRX2 si colloca all’interno delle reti di risposta allo stress ossidativo e delle vie di segnalazione dipendenti dal glutatione che plasmano l’adattamento cellulare agli squilibri redox. Un controllo redox alterato che coinvolge GLRX2 è stato studiato in contesti di disfunzione mitocondriale e danno ossidativo rilevanti per la neurodegenerazione, lo stress cardiometabolico e i meccanismi di sopravvivenza delle cellule tumorali.
Grx2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GLRX2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GLRX2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GLRX2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GLRX2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.