GPR87 Plasmide Double Nickase (m): sc-429972-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPR87 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPR87 Double Nickase Plasmid (m) e il GPR87 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Gpr87. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPR87 Plasmide Double Nickase (m) | sc-429972-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Gpr87** codifica **GPR87**, un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) di tipo rodopsina, coinvolto nel collegare segnali extracellulari a vie intracellulari di secondi messaggeri e a programmi trascrizionali. Le attività descritte collegano GPR87 alla regolazione della progressione del ciclo cellulare, alla segnalazione in risposta allo stress e all’omeostasi epiteliale attraverso vie associate ai GPCR, come MAPK/ERK e processi dipendenti da PI3K. Alterazioni dell’espressione di GPR87 sono state associate a fenotipi proliferativi e alla biologia dei tumori epiteliali, rendendolo un bersaglio utile per analizzare reti di segnalazione GPCR specifiche del contesto. In modelli murini e sistemi cellulari, la perturbazione di **Gpr87** supporta studi meccanicistici sulla segnalazione guidata dal recettore, sul controllo dello stato di differenziamento e sul crosstalk tra vie di segnalazione.
GPR87 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Gpr87 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Gpr87. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Gpr87. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Gpr87 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.