Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Plasmide Double Nickase (h): sc-404694-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase Plasmid (h) e il Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GPX7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404694-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404694-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPX7 codifica la glutatione perossidasi 7, una perossidasi tiolica localizzata nel reticolo endoplasmatico che limita l’accumulo di perossido di idrogeno e di idroperossidi lipidici e contribuisce a mantenere l’omeostasi del ripiegamento proteico. Sostenendo il buffering redox e il controllo qualità delle proteine nel RE, GPX7 si interfaccia con le risposte allo stress ossidativo e con la segnalazione della risposta alle proteine mal ripiegate (UPR), influenzando secrezione, proteostasi e sopravvivenza cellulare in condizioni di stress. Alterazioni dell’attività di GPX7 sono state associate a una disregolazione della segnalazione redox, a una maggiore sensibilità allo stress del RE e a cambiamenti nei programmi di proliferazione e apoptosi osservati in molteplici contesti rilevanti per la malattia, inclusi il danno tissutale associato all’infiammazione e la biologia tumorale. Di conseguenza, GPX7 è frequentemente studiata in modelli di danno ossidativo, squilibrio della proteostasi e reti di segnalazione dipendenti dal redox.
Glutathione Peroxidase 7/GPX7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GPX7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GPX7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GPX7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GPX7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.