Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420662-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Double Nickase Plasmid (m) e il Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Gpx1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420662-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Gpx1 codifica la glutatione perossidasi 1 (GPX1), un enzima antiossidante selenio-dipendente che riduce il perossido di idrogeno e gli idroperossidi lipidici utilizzando il glutatione, limitando così il danno ossidativo a proteine, lipidi e DNA. L’attività di GPX1 sostiene l’omeostasi redox cellulare e si integra con il metabolismo del glutatione, la detossificazione dei perossidi e vie di segnalazione sensibili allo stress che influenzano la funzione mitocondriale e le risposte infiammatorie. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di GPX1 sono state associate a fenotipi da stress ossidativo rilevanti per disfunzioni metaboliche, neurodegenerazione e patologie cardiovascolari, in cui una gestione deregolata delle ROS contribuisce al danno cellulare. In quanto enzima citosolico/perossisomiale ampiamente espresso, GPX1 è spesso studiato come nodo di collegamento tra bilanciamento redox, regolazione genica e risposte adattative allo stress.
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Gpx1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Gpx1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Gpx1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Gpx1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.