Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424976

概要

Slc2a8 は、マウス細胞における細胞内および膜関連のグルコース取扱いに寄与する促進拡散型ヘキソーストランスポーターであるグルコーストランスポーター GLUT8 をコードします。GLUT8 は、解糖系および下流の代謝経路に利用されるグルコースの可用性を調節することで細胞のエネルギーバランスを支え、インスリン応答性の栄養センシングや臓器特異的な代謝恒常性とも機能的に関連します。特化した組織では、Slc2a8 活性の変化がグルコースフラックス、酸化代謝、ならびに内分泌・生殖生理と交差するストレス応答に影響を及ぼし得ます。GLUT ファミリーの輸送過程の破綻は、代謝機能障害モデル全般に広く関係し、栄養輸送が細胞の増殖・分化・生存プログラムをどのように形成するかを検討する研究においても重要です。

Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc2a8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc2a8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc2a8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glucose Transporter Glut8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glucose Transporter Glut8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc2a8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glucose Transporter Glut8の機能に不可欠なSlc2a8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc2a8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGlucose Transporter Glut8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc2a8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glucose Transporter Glut8 HDRプラスミド（m）および Glucose Transporter Glut8 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc2a8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc2a8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。