Glucose Transporter Glut1 Plasmide Double Nickase (m): sc-422998-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Glucose Transporter Glut1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Glucose Transporter Glut1 Double Nickase Plasmid (m) e il Glucose Transporter Glut1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc2a1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Glucose Transporter Glut1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-422998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glucose Transporter Glut1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-422998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc2a1 codifica il trasportatore facilitato del glucosio GLUT1 (SLC2A1), un trasportatore ad alta affinità che media l’assorbimento basale di glucosio attraverso la membrana plasmatica in molti tipi cellulari del topo, comprese le linee endoteliali e immunitarie. Controllando la disponibilità intracellulare di glucosio, GLUT1 sostiene la glicolisi, il metabolismo ossidativo e le vie biosintetiche che influenzano la crescita cellulare, l’equilibrio redox e le risposte allo stress. L’espressione di Slc2a1 e il traffico di GLUT1 sono regolati in modo rigoroso dal sensing dei nutrienti e dalla segnalazione dell’ipossia, integrando segnali provenienti da vie come i programmi trascrizionali dipendenti da HIF e le reti di omeostasi energetica. Un’alterata attività di GLUT1 è associata alla riprogrammazione metabolica in contesti proliferativi e infiammatori, e Slc2a1 è ampiamente studiato in modelli di funzione neurovascolare, immunometabolismo e difetti del trasporto del glucosio.
Glucose Transporter Glut1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc2a1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc2a1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc2a1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc2a1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.