Glucagon Receptor Plasmide Double Nickase (h): sc-402018-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Glucagon Receptor Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Glucagon Receptor Double Nickase Plasmid (h) e il Glucagon Receptor Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GCGR. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Glucagon Receptor Plasmide Double Nickase (h) | sc-402018-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glucagon Receptor Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402018-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GCGR** codifica il recettore del glucagone, un recettore accoppiato a proteine G di classe B che regola la produzione epatica di glucosio e il bilancio energetico dell’intero organismo in risposta al glucagone. In seguito al legame con il ligando, GCGR si accoppia principalmente a **Gs** aumentando i livelli di **cAMP** e attivando **PKA**, integrandosi con programmi trascrizionali dipendenti da **CREB** che regolano gluconeogenesi, glicogenolisi e metabolismo lipidico. La segnalazione di GCGR interseca la controregolazione insulina–glucagone, il sensing dei nutrienti e il controllo endocrino dell’omeostasi metabolica. Un’attività deregolata della via di GCGR è implicata in fenotipi rilevanti per le malattie metaboliche, tra cui alterazioni del controllo glicemico, della gestione epatica dei lipidi e disfunzioni dell’asse endocrino pancreas–fegato.
Glucagon Receptor Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GCGR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GCGR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GCGR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GCGR interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.