GIPR Plasmide Double Nickase (h): sc-402895-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GIPR Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GIPR Double Nickase Plasmid (h) e il GIPR Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GIPR. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GIPR Plasmide Double Nickase (h) | sc-402895-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GIPR Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402895-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GIPR codifica il recettore del polipeptide insulinotropico glucosio-dipendente (GIP), un GPCR di classe B prevalentemente accoppiato a Gs che aumenta i livelli intracellulari di cAMP e attiva la PKA e la trascrizione a valle mediata da CREB. Nelle cellule β pancreatiche e in altri tessuti metabolici, GIPR integra la segnalazione incretinica indotta dai nutrienti per modulare la secrezione di insulina, il metabolismo dei lipidi e il bilancio energetico, con crosstalk delle vie ERK/MAPK e PI3K a seconda del contesto cellulare. Alterazioni dell’espressione di GIPR o della dinamica della sua segnalazione sono state associate a fenotipi metabolici, inclusi obesità e disglicemia; il recettore è inoltre studiato per il suo ruolo nella biologia degli adipociti e nell’adattamento delle isole pancreatiche sotto stress metabolico.
GIPR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GIPR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GIPR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GIPR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GIPR interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.