GIP Plasmide Double Nickase (h): sc-402545-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GIP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GIP Double Nickase Plasmid (h) e il GIP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GIP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GIP Plasmide Double Nickase (h) | sc-402545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GIP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il polipeptide insulinotropico glucosio-dipendente (GIP) è un ormone incretinico prodotto principalmente dalle cellule K intestinali e secreto in risposta all’assunzione di nutrienti. Il legame del GIP al suo recettore accoppiato a proteina G attiva la segnalazione cAMP/PKA, potenziando la secrezione di insulina stimolata dal glucosio e influenzando la funzione delle cellule β pancreatiche, la gestione dei lipidi negli adipociti e l’equilibrio energetico sistemico. La segnalazione del GIP interagisce con reti metaboliche e infiammatorie che regolano il sensing dei nutrienti e il cross-talk endocrino. La disregolazione dell’asse GIP è stata associata a obesità, insulino-resistenza e fenotipi cardiometabolici correlati, a supporto del suo impiego come nodo molecolare per lo studio dell’omeostasi metabolica.
GIP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GIP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GIP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GIP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GIP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.