GGT5 Plasmide Double Nickase (h): sc-405055-NIC

Il gene umano **GGT5** codifica la **gamma-glutamiltransferasi 5**, un ectoenzima di superficie cellulare che catalizza reazioni di trasferimento gamma-glutamilico coinvolte nel metabolismo del glutatione e dei leucotrieni. Elaborando substrati gamma-glutamilici, GGT5 contribuisce al turnover extracellulare del glutatione, al recupero degli amminoacidi e all’omeostasi redox, con effetti a valle sulla segnalazione dello stress ossidativo e sulle vie infiammatorie. La sua attività interseca la biologia degli eicosanoidi tramite la conversione del leucotriene C4 e può influenzare le risposte cellulari in contesti immunitari ed epiteliali. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di GGT5 sono state studiate in relazione a infiammazione tissutale, stress metabolico e processi del microambiente associati ai tumori, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sulle reti redox e dei mediatori lipidici.

GGT5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GGT5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GGT5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GGT5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GGT5 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.