gasdermin C Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-429915

Panoramica

Il gene murino **Gsdmc** codifica per **gasdermin C**, un membro della famiglia delle gasdermine implicato nella morte cellulare regolata e nella permeabilizzazione infiammatoria della membrana a valle dell’attivazione proteasica. Le gasdermine possono agire come esecutori di processi simili alla piroptosi formando pori nella membrana plasmatica, influenzando così il rilascio di citochine, l’integrità della barriera epiteliale e la segnalazione dell’immunità innata. L’espressione di **Gsdmc** è arricchita in contesti epiteliali ed è stata collegata a risposte allo stress che si intersecano con l’infiammazione guidata da NF-κB e con programmi di rimodellamento tissutale. Un’attività delle gasdermine deregolata è quindi rilevante per lo studio della patologia infiammatoria, delle interazioni ospite–microbo e dei fenotipi di morte cellulare associati al cancro in modelli murini.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO gasdermin C (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Gsdmc in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Gsdmc insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Gsdmc a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina gasdermin C.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Gsdmc per lo studio della segnalazione di gasdermin C, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Gsdmc critici per la funzione di gasdermin C
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Gsdmc per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal gasdermin C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal gasdermin C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Gsdmc. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal gasdermin C Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR gasdermin C (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Gsdmc per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Gsdmc definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.