Gas6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420490

Panoramica

Growth arrest–specific 6 (Gas6) è un ligando secreto dipendente dalla vitamina K che interagisce con le tirosin-chinasi recettoriali della famiglia TAM, principalmente AXL, MERTK e TYRO3, per regolare la sopravvivenza cellulare, la proliferazione e le risposte migratorie. Attraverso la segnalazione mediata dai TAM, Gas6 influenza le vie a valle PI3K–AKT, MAPK/ERK e NF-κB e favorisce la rimozione delle cellule apoptotiche tramite un riconoscimento dipendente dalla fosfatidilserina. Nei modelli murini, Gas6 è implicato nell’omeostasi dell’immunità innata, nell’efferocitosi dei macrofagi e nella modulazione del tono infiammatorio, con rilevanza per processi quali fibrosi, trombosi e interazioni tra tumore e sistema immunitario nel microambiente.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Gas6 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Gas6 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Gas6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Gas6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Gas6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Gas6 per lo studio della segnalazione di Gas6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Gas6 critici per la funzione di Gas6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Gas6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Gas6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Gas6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Gas6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Gas6 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Gas6 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Gas6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Gas6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.