G1P3 Plasmide Double Nickase (h): sc-403682-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- G1P3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il G1P3 Double Nickase Plasmid (h) e il G1P3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IFI6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
G1P3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403682-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
G1P3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403682-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’IFI6 umano codifica la proteina G1P3 inducibile dall’interferone alfa, un piccolo fattore associato alle membrane la cui espressione viene indotta a valle della segnalazione dell’interferone di tipo I attraverso la via JAK–STAT. G1P3 è stata collegata alla modulazione dell’integrità mitocondriale e dei programmi di sopravvivenza cellulare, con effetti riportati sulla sensibilità all’apoptosi e sulle risposte allo stress cellulare. In quanto gene stimolato dall’interferone, IFI6 partecipa alla regolazione dello stato immunitario innato e a programmi trascrizionali che rimodellano le difese antivirali e le reti di segnalazione infiammatoria. Un’espressione deregolata di IFI6 è stata osservata in molteplici contesti patologici caratterizzati da attività interferonica cronica, incluse condizioni infiammatorie e tumori, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici dei fenotipi guidati dall’interferone.
G1P3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IFI6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IFI6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IFI6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IFI6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.