FUT2 Plasmide Double Nickase (h): sc-409559-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FUT2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FUT2 Double Nickase Plasmid (h) e il FUT2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FUT2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FUT2 Antibody (9T-8): sc-100742
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FUT2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409559-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FUT2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409559-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **FUT2** codifica una **fucosiltransferasi α(1,2)** che catalizza la fucosilazione terminale dei glicani su glicoproteine e glicolipidi secreti e presenti sulla superficie mucosale, contribuendo a determinare la presentazione degli antigeni **ABO(H)** nelle secrezioni. Questo enzima localizzato nel Golgi partecipa a vie di glicosilazione che regolano le interazioni della barriera epiteliale, il riconoscimento cellula–microbo e la segnalazione mediata da lectine, modificando il panorama dei glicani. La variabilità genetica di **FUT2** influenza lo stato di “secretore” ed è stata associata a una diversa suscettibilità alle infezioni enteriche e alla composizione del microbioma, evidenziandone la rilevanza nelle interfacce ospite–patogeno. Alterazioni dei pattern di **fucosilazione α1,2** sono inoltre studiate nel contesto di disturbi infiammatori e del rimodellamento dei glicani associato al cancro, come indicatori funzionali dell’attività delle glicosiltransferasi.
FUT2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FUT2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FUT2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FUT2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FUT2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.