FUT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409559
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FUT2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FUT2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FUT2 Anticorpo (9T-8): sc-100742
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FUT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409559 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FUT2 codifica a α(1,2)-fucosiltransferase 2, uma glicosiltransferase residente no Golgi que catalisa a fucosilação terminal de glicanos para gerar antígenos H tipo 1/2 em superfícies epiteliais mucosas e em secreções. Ao controlar motivos de glicanos fucosilados em glicoproteínas e glicolipídios, a FUT2 influencia o tráfego de proteínas, as propriedades de barreira do epitélio e as interações hospedeiro–microrganismo na mucosa intestinal e das vias aéreas. A variação genética e a atividade alterada de FUT2 estão associadas ao status secretor e a diferenças correspondentes nos padrões de glicosilação mucosa, que se correlacionam com suscetibilidade a fenótipos infecciosos e inflamatórios. Como regulador-chave de eventos de reconhecimento dependentes de glicanos, a FUT2 é amplamente estudada em glicômica, biologia do microbioma e imunologia epitelial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FUT2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FUT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FUT2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FUT2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FUT2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FUT2 para a investigação da sinalização de FUT2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FUT2 críticos para a função FUT2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FUT2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FUT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FUT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FUT2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FUT2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FUT2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FUT2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FUT2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.