Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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fumarate hydratase Plasmide Double Nickase (h): sc-401660-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- fumarate hydratase Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il fumarate hydratase Double Nickase Plasmid (h) e il fumarate hydratase Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FH. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: fumarate hydratase Antibody (H-6): sc-393992
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
fumarate hydratase Plasmide Double Nickase (h) | sc-401660-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
fumarate hydratase Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401660-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **FH** codifica la fumarato idratasi (fumarasi), un enzima chiave del ciclo dell’acido tricarbossilico (TCA) che catalizza l’idratazione reversibile del fumarato a **L-malato**, sostenendo il metabolismo ossidativo e l’equilibrio redox cellulare. Regolando i livelli di fumarato, FH influenza la bioenergetica mitocondriale e la segnalazione dipendente dai metaboliti, incluse vie collegate alle risposte all’ipossia e alla regolazione epigenetica. L’alterazione della funzione di FH è associata all’accumulo di fumarato e a un ampio rimodellamento metabolico, che può modificare la gestione dello stress ossidativo e i programmi trascrizionali. Queste caratteristiche rendono FH un nodo ampiamente utilizzato per studiare il metabolismo mitocondriale, la biologia degli oncometaboliti e il controllo metabolico dello stato cellulare.
fumarate hydratase Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FH nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FH. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FH. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FH interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.