FucT-VII Plasmide Double Nickase (h): sc-408027-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FucT-VII Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FucT-VII Double Nickase Plasmid (h) e il FucT-VII Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FUT7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FucT-VII Plasmide Double Nickase (h) | sc-408027-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FucT-VII Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408027-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT7 codifica la α1,3-fucosiltransferasi VII (FucT-VII), una glicosiltransferasi localizzata nell’apparato di Golgi che catalizza le fasi terminali di fucosilazione necessarie per la sintesi di sialyl Lewis X e di glicani fucosilati correlati. Questa attività è centrale nella biologia dell’adesione leucocitaria perché consente la formazione di ligandi funzionali delle selectine su glicoproteine e glicolipidi, sostenendo il rolling dei leucociti e il loro traffico durante l’infiammazione. La glicosilazione mediata da FUT7 si intreccia con vie più ampie di biosintesi dei glicani che modellano il riconoscimento cellula-cellula, la segnalazione recettoriale e l’architettura di superficie delle cellule immunitarie. Alterazioni dell’espressione di FUT7 o dei pattern di fucosilazione sono state associate a risposte infiammatorie disregolate e al rimodellamento dei glicani associato ai tumori, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sull’adesione e sulle interazioni tra glicosilazione e sistema immunitario.
FucT-VII Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FUT7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FUT7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FUT7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FUT7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.