FucT-VI Plasmide Double Nickase (h): sc-409615-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FucT-VI Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FucT-VI Double Nickase Plasmid (h) e il FucT-VI Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FUT6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FucT-VI Plasmide Double Nickase (h) | sc-409615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FucT-VI Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUT6 codifica l’α(1,3)-fucosiltransferasi VI (FucT-VI), una glicosiltransferasi residente nel Golgi che trasferisce il fucosio dal GDP-fucosio su accettori N-acetillattosamina per generare glicani fucosilati di tipo Lewis X. Modellando i pattern di fucosilazione terminale su glicoproteine e glicolipidi, FucT-VI contribuisce al riconoscimento cellula–cellula dipendente dai glicani, alla biologia dell’adesione leucocitaria e alla regolazione delle proprietà di recettori e proteine secrete all’interno delle più ampie reti di fucosilazione e glicosilazione. L’attività di FUT6 è collegata alla biosintesi di specifici ligandi delle selectine e alla modulazione di contesti di segnalazione infiammatoria tramite epitopi glicanici alterati. Variazioni nell’espressione o nella funzione di FUT6 sono state associate a cambiamenti nei profili di glicosilazione sierica e a fenotipi glicanici rilevanti per la malattia, studiati in immunologia, biologia delle infezioni e ricerca oncologica.
FucT-VI Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FUT6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FUT6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FUT6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FUT6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.