FTSJD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-409236-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FTSJD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FTSJD2 Double Nickase Plasmid (h) e il FTSJD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CMTR1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FTSJD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409236-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FTSJD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409236-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CMTR1 (nota anche come FTSJD2) codifica una metiltransferasi 2′-O del ribosio specifica per il cap, che catalizza la formazione della struttura cap1 dell’mRNA sui trascritti della RNA polimerasi II. Questa modifica favorisce un’elaborazione efficiente del pre-mRNA, la traduzione e la stabilità dei trascritti, e contribuisce a determinare la discriminazione immunitaria innata tra RNA “self” e “non-self” attraverso vie di riconoscimento dell’RNA collegate all’interferone. L’attività di CMTR1 è integrata in programmi più ampi di metabolismo dell’RNA che influenzano l’omeostasi dell’espressione genica nelle cellule umane. La deregolazione della macchina di metilazione del cap, inclusi i passaggi dipendenti da CMTR1, viene studiata nel contesto di alterazioni della segnalazione dell’interferone, delle risposte antivirali e della riscrittura trascrizionale associata al cancro.
FTSJD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CMTR1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CMTR1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CMTR1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CMTR1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.