Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Fra2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420403
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Fra2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Fra2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Fra2 Anticuerpo (G-5): sc-166102
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Fra2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420403 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Fosl2 codifica Fra2 (antígeno 2 similar a FOS), un factor de transcripción de cremallera de leucina básica que dimeriza con proteínas JUN para formar complejos AP-1 que controlan la expresión génica dependiente de estímulos. En células de ratón, Fra2 integra la señalización MAPK/ERK y JNK para regular programas vinculados a la proliferación, la diferenciación, la remodelación de la matriz extracelular y las respuestas al estrés. La actividad de Fra2 influye en las decisiones de linaje en los compartimentos óseo e inmunitario y modula circuitos transcripcionales inflamatorios. La desregulación de la señalización AP-1/Fra2 se ha asociado con remodelación patológica y estados transcripcionales oncogénicos, lo que convierte a Fosl2 en un nodo útil para estudios mecanísticos del control transcripcional específico del contexto.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Fra2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Fosl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Fosl2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Fosl2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Fra2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Fosl2 para la investigación de la señalización de Fra2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Fosl2 críticos para la función de Fra2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Fosl2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Fra2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Fra2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Fosl2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Fra2 (m) y el plásmido HDR Fra2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Fosl2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Fosl2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.