FOXI1 Plasmide Double Nickase (h): sc-408728-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXI1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXI1 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXI1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXI1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXI1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408728-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXI1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408728-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXI1 (forkhead box I1) è un fattore di trascrizione di tipo winged-helix che regola la specificazione delle linee epiteliali e i programmi di trasporto ionico, in particolare nell’orecchio interno e nel rene. Modula reti trascrizionali che controllano l’omeostasi acido-base e l’espressione di geni per canali e trasportatori, integrandosi con vie più ampie di sviluppo e differenziamento governate dai fattori della famiglia forkhead. Alterazioni genetiche di FOXI1 sono state associate a patologie sindromiche e non sindromiche che coinvolgono la funzione del tubulo renale distale e la fisiologia uditiva, rendendolo un nodo utile per studiare la maturazione dell’epitelio e il controllo trascrizionale specifico d’organo. Nei modelli cellulari, l’attività di FOXI1 può essere analizzata per collegare la regolazione trascrizionale a cambiamenti a valle nell’espressione dei trasportatori, nella polarizzazione cellulare e nella segnalazione di risposta allo stress.
FOXI1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXI1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXI1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXI1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXI1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.