Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FKHR/FOXO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400137-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FKHR/FOXO1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FKHR/FOXO1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FKHR/FOXO1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FOXO1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FKHR/FOXO1 Anticorpo (C-9): sc-374427
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FKHR/FOXO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKHR/FOXO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXO1 (FKHR) codifica um fator de transcrição da família forkhead box que integra a sinalização de insulina/IGF-1 e PI3K–AKT com programas celulares que controlam o metabolismo, as respostas ao estresse oxidativo, a parada do ciclo celular e a apoptose. A fosforilação dependente de AKT regula o trânsito nucleocitoplasmático de FOXO1 e sua atividade transcricional, conectando o estado nutricional a programas de expressão gênica como a gliconeogênese e a autofagia. O FOXO1 também interage com as vias TGF-β/SMAD e MAPK para modular a diferenciação e a homeostase tecidual. A atividade ou a localização desregulada de FOXO1 está implicada em disfunções metabólicas e na biologia do câncer, e alterações genômicas de FOXO1, como eventos de fusão, são usadas para estudar a reprogramação transcricional oncogênica.
FKHR/FOXO1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FOXO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FOXO1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FOXO1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FOXO1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.