fish CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401277

개요

SH3PXD2A는 Src 기질로서 어댑터 단백질 TKS5를 암호화하며, 포도좀(podosome)과 인바도포디아(invadopodia) 형성에 필요한 액틴 조절 및 신호전달 복합체를 스캐폴딩합니다. TKS5는 SH3 도메인과 PX 도메인을 통해 PI3K 의존적 막 역학, 액틴 중합 기계, 금속단백분해효소 운반을 조율하여 세포외기질 재구성과 세포 이동을 뒷받침합니다. SH3PXD2A에 의해 유도되는 세포골격 재조직화는 침습적 세포 행동과 조직 구조 변화와 연관되어 있어, 종양 진행, 섬유화 관련 재형성, 혈관 세포 운동성 연구에서 중요한 표적입니다. 면역 및 기질(stromal) 환경에서는 TKS5의 교란이 부착 구조와 방향성 이동 프로그램에 영향을 미치며, 이는 Src/FAK 신호와 Rho 계열 GTPase 경로와 교차합니다.

fish CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SH3PXD2A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SH3PXD2A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SH3PXD2A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 fish 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 fish 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SH3PXD2A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• fish 기능에 중요한 SH3PXD2A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SH3PXD2A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• fish CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 fish CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SH3PXD2A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  fish HDR 플라스미드 (h) 및 fish HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SH3PXD2A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SH3PXD2A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.