Date published: 2026-7-20

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Fibrillarin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400741-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • FibrillarinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase Fibrillarin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Fibrillarin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FBL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fibrillarin Anticorpo (G-8): sc-374022
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    Fibrillarin Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-400741-NIC
    20 µg
    $410.00

    Fibrillarin Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-400741-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O FBL codifica a fibrilarina, uma metiltransferase nucleolar conservada que catalisa a metilação 2′-O da ribose do rRNA em complexos snoRNP de box C/D. Essa atividade é essencial para o processamento do pré-rRNA, a biogênese de ribossomos e a manutenção da estrutura do nucléolo, conectando a função do FBL ao controle global da síntese proteica e de programas de crescimento celular. A fibrilarina também participa da coordenação de vias de modificação de RNA que acoplam transcrição, maturação do rRNA e tradução. Alterações na atividade nucleolar e a biogênese ribossomal desregulada envolvendo o FBL têm sido associadas a estados de estresse proliferativo e são frequentemente investigadas na biologia do câncer e em pesquisas focadas em ribossomopatias.

    Fibrillarin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FBL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FBL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FBL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FBL interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.