Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
FBL10 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403232
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FBL10 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在FBL10基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：FBL10: sc-293279，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FBL10 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403232 | 20 µg | $397.00 |
概述
KDM2B 编码人类蛋白 FBL10，它是一种含 JmjC 结构域的组蛋白赖氨酸去甲基化酶，可通过其 CxxC 锌指识别富含 CpG 的 DNA，并调节染色质可及性。FBL10 参与 Polycomb 相关的转录抑制，并有助于协调控制细胞周期进程、谱系承诺以及细胞身份维持的表观遗传程序。通过调控组蛋白甲基化状态以及启动子/增强子活性，KDM2B 影响调节增殖与分化的多条通路。KDM2B 活性失调及其染色质定位异常，已在多种癌症与造血相关背景中与致癌性转录状态和异常的干细胞样表型相关联，因此该基因位点常用于表观遗传调控机制研究。
FBL10 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中KDM2B基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对KDM2B基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏KDM2B开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使FBL10蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建KDM2B缺失的细胞模型，用于FBL10信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 FBL10 功能至关重要的 KDM2B 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 KDM2B 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 FBL10 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 FBL10 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 KDM2B 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 FBL10 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 FBL10 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由KDM2B同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定KDM2B靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。