FAM208A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405884

Panoramica

FAM208A codifica una proteina nucleare che partecipa a processi associati alla cromatina, influenzando la regolazione trascrizionale e il mantenimento del genoma. È stata collegata alle vie di risposta al danno del DNA e al controllo epigenetico attraverso interazioni con complessi nucleari multiproteici, supportando una corretta progressione del ciclo cellulare e l’adattamento allo stress. Un’alterata regolazione dell’organizzazione della cromatina e della fedeltà dei meccanismi di riparazione che coinvolgono FAM208A può contribuire ai fenotipi di instabilità genomica osservati nel cancro e in altri disturbi proliferativi. La sua localizzazione prevalentemente nucleare la rende un bersaglio utile per analizzare i meccanismi che collegano lo stato della cromatina all’espressione genica e agli esiti della riparazione del DNA nelle cellule umane.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM208A (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FAM208A in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FAM208A insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FAM208A a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FAM208A.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FAM208A per lo studio della segnalazione di FAM208A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FAM208A critici per la funzione di FAM208A
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FAM208A per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FAM208A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FAM208A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FAM208A. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FAM208A Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FAM208A (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FAM208A per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FAM208A definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.