FAM171A1 Plasmide Double Nickase (h): sc-415117-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FAM171A1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FAM171A1 Double Nickase Plasmid (h) e il FAM171A1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FAM171A1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FAM171A1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-415117-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FAM171A1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-415117-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM171A1 codifica una proteina transmembrana implicata nella regolazione delle interazioni cellula–cellula e della segnalazione associata alla membrana, con un’espressione arricchita nei tessuti neurali. Evidenze emergenti collegano FAM171A1 a programmi di guida assonale e di crescita dei neuriti, suggerendo un ruolo nel modellare la connettività neuronale e l’organizzazione sinaptica. In quanto potenziale modulatore del contesto dei recettori di superficie e della segnalazione dipendente dall’adesione, FAM171A1 potrebbe influenzare la dinamica del citoscheletro e vie di patterning dello sviluppo. Un’alterata espressione o variazioni genetiche in FAM171A1 sono state esaminate in studi su fenotipi neuroevolutivi e neuropsichiatrici, a supporto della sua rilevanza per indagini meccanicistiche nella biologia del sistema nervoso.
FAM171A1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FAM171A1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FAM171A1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FAM171A1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FAM171A1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.