Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
FAM118B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-413182
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FAM118B Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico FAM118B, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FAM118B Antibody (C-11): sc-514039
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FAM118B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-413182 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
FAM118B codifica una proteina umana scarsamente caratterizzata, che si prevede partecipi alla homeostasi cellulare fondamentale, con evidenze emergenti che collegano i membri della famiglia FAM118 a processi associati all’RNA e all’organizzazione nucleare. L’espressione basale di FAM118B nei vari tessuti suggerisce un ruolo nel mantenimento di programmi core di espressione genica che intersecano la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e le reti di proteostasi. Pattern di espressione alterati sono stati riportati in dataset oncologici multi-omici e in altri contesti patologici, supportandone l’uso come regolatore candidato in studi di biologia tumorale e fitness cellulare. Poiché la sua funzione molecolare rimane definita solo parzialmente, FAM118B si presta bene a indagini guidate da ipotesi mediante perturbazione genetica, per mappare vie a valle e partner di interazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM118B (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FAM118B in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FAM118B insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FAM118B a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FAM118B.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FAM118B per lo studio della segnalazione di FAM118B, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni FAM118B critici per la funzione di FAM118B
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FAM118B per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal FAM118B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FAM118B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FAM118B. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal FAM118B Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FAM118B (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FAM118B per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FAM118B definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.