Ets-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423871

Descripción general

El gen Ets2 de ratón codifica el factor de transcripción de la familia ETS Ets-2, un regulador de unión al ADN que modula programas de expresión génica que controlan la proliferación, la diferenciación, la supervivencia y la remodelación de la matriz extracelular. Ets-2 integra señales aguas abajo de MAPK/ERK y de cascadas de quinasas relacionadas, lo que permite respuestas transcripcionales dependientes del estímulo que moldean la activación de células inmunitarias, los procesos del desarrollo y la homeostasis tisular. La actividad desregulada de ETS2 se ha relacionado con cambios en la expresión de genes inflamatorios, un comportamiento anómalo del estroma y del epitelio, y redes transcripcionales oncogénicas en múltiples sistemas modelo. Como regulador transcripcional nodal, Ets-2 se estudia comúnmente por sus funciones en el control transcripcional de citocinas, metaloproteinasas de la matriz y genes asociados al ciclo celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ets-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ets2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ets2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ets2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ets-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ets2 para la investigación de la señalización de Ets-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ets2 críticos para la función de Ets-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ets2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ets-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Ets-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ets2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ets-2 (m) y el plásmido HDR Ets-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ets2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ets2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.