Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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Estrogen Receptor beta Plasmide di attivazione CRISPR (r): sc-437278-ACT
- Specie Target: rat
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Estrogen Receptor beta Plasmide di attivazione CRISPR (r) è un mediatore sinergico di attivazione (SAM) del sistema di attivazione trascrizionale disegnato per upregolare specificatamente l'espressione genica
- Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r) consiste di tre plasmidi in proporzione 1:1:1 : un plasmide che codifica la nucleasi (D10A and N863A) Cas9 (dCas9) deattivata fusa al dominio di transattivazione VP64, ed un gene di resistenza alla blasticina; un plasmide che codifica per la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, ed un gene di resistenza all'igromicina;un plasmide che codifica un RNA guida di 20 nt target specifico, e un gene di resistenza alla puromicina.
- Il complesso SAM legae una regione sito-specifica circa 200-250 nt a monte del sito di start trascrizionale e fornisce un robusto reclutamento di fattori trascrizionali per un'attivazione altamente efficiente del gene target
- I gRNA codificati dal Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r) e dal Estrogen Receptor beta CRISPR Activation Plasmid (r2) prendono di mira regioni regolatorie distinte a monte del sito di inizio della trascrizione di . Uno o entrambi i modelli potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Estrogen Receptor beta Antibody (B-1): sc-390243
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Estrogen Receptor beta Plasmide di attivazione CRISPR (r) | sc-437278-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Estrogen Receptor beta Plasmide di attivazione CRISPR (r2) | sc-437278-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Il recettore beta degli estrogeni (ERβ), codificato dal gene Esr2 del ratto, è un recettore nucleare attivato dal legame con il ligando che funge da fattore di trascrizione per regolare reti di geni responsivi agli estrogeni. Dopo il legame con l’ormone, ERβ modula la cromatina e recluta co-regolatori per controllare programmi coinvolti nella proliferazione cellulare, nella differenziazione, nell’apoptosi e nell’omeostasi metabolica. La segnalazione di ERβ interseca le vie PI3K/AKT, MAPK/ERK e quelle infiammatorie, plasmando risposte specifiche di tessuto negli organi riproduttivi, nel cervello, nell’osso e nel sistema cardiovascolare. Un’attività di ERβ deregolata e un’alterazione dell’equilibrio della segnalazione estrogenica sono state implicate nella biologia dei tumori ormono-responsivi, nella neuroinfiammazione e nella disfunzione metabolica, rendendo Esr2 un bersaglio utile per studi meccanicistici in modelli di ratto.
Estrogen Receptor beta Il plasmide di attivazione CRISPR (r) fornisce un approccio mirato e non distruttivo per sovraregolare l'espressione endogena di senza alterare la sequenza di DNA sottostante.
Estrogen Receptor beta Il plasmide di attivazione CRISPR (r) è un sistema SAM (mediatore di attivazione sinergico) a tre plasmidi progettato per la sovraregolazione trascrizionale altamente efficiente e sito-specifica del locus nelle linee cellulari umane. Il sistema è costruito attorno a una Cas9 cataliticamente inattiva (dCas9) che porta due mutazioni inattivanti (D10A e N863A) che eliminano l'attività nucleasica preservando al contempo il legame con il DNA. Questa dCas9 è fusa con VP64, un potente attivatore trascrizionale, ed è coespressa con un gene di resistenza alla blasticidina per la selezione. Il secondo plasmide codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, un complesso attivatore secondario che agisce in sinergia con dCas9-VP64, insieme a un gene di resistenza all'igromicina. Il terzo plasmide codifica un sgRNA specifico per il bersaglio di 20 nt fuso a due aptameri di RNA MS2 che reclutano il complesso MS2-p65-HSF1 nel sito di attivazione, accompagnato da un gene di resistenza alla puromicina. I tre plasmidi vengono somministrati in un rapporto di massa 1:1:1 per un'espressione bilanciata di tutti i componenti del sistema.
Una volta assemblato nel locus bersaglio, il complesso SAM si lega a circa 200 bp a monte del sito di inizio della trascrizione , dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo concertato per reclutare il machinery trascrizionale e guidare la sovraregolazione dell'espressione endogena di Estrogen Receptor beta. A differenza della Cas9 con attività nucleasica, dCas9 non introduce rotture a doppio filamento né modifica la sequenza genomica, preservando il locus nativo e consentendo lo studio delle risposte trascrizionali dipendenti da Estrogen Receptor beta nel locus endogeno, rendendolo uno strumento prezioso per studi funzionali, l'identificazione di geni bersaglio e la modellizzazione del ripristino della via Estrogen Receptor beta nelle cellule tumorali con espressione di silenziata o ridotta.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.