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ESE-1双切口酶质粒(h) | sc-403728-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ESE-1双切口酶质粒(h2) | sc-403728-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELF3 编码上皮细胞特异性的 ETS 转录因子 ESE-1,它是一种位于细胞核内的基因调控因子,负责调控塑造上皮分化、细胞极性以及屏障相关功能的基因程序。ESE-1 能整合来自炎症与应激反应通路的信号(包括与 NF-κB 相关的转录网络),从而调节对细胞因子反应的基因以及上皮谱系相关基因。ELF3 的表达或活性发生改变,已被认为与多种上皮来源肿瘤背景及炎症性疾病模型中观察到的上皮稳态失衡和转录重编程有关。因此,ELF3/ESE-1 常被用于研究其在维持上皮细胞身份、刺激依赖性转录以及影响增殖与分化的通路串扰中的作用。
ESE-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ELF3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ELF3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ELF3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ELF3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。