Eps8L1 Plasmide Double Nickase (h): sc-406032-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Eps8L1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Eps8L1 Double Nickase Plasmid (h) e il Eps8L1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EPS8L1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Eps8L1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Eps8L1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPS8L1 codifica Eps8L1, un membro della famiglia EPS8 di proteine regolatrici dell’actina che collegano la segnalazione mediata dai recettori al rimodellamento del citoscheletro. Eps8L1 è implicata in vie che governano la dinamica dei filamenti di actina, la formazione di protrusioni di membrana e i cambiamenti di forma cellulare che supportano adesione e motilità. Attraverso interazioni con partner di segnalazione e del citoscheletro, EPS8L1 può influenzare processi quali l’endocitosi e il rimodellamento, associato alla migrazione, della rete di actina corticale. Un controllo disregolato dell’actina e dei programmi di motilità è frequentemente associato a fenotipi invasivi e a un’organizzazione tissutale aberrante, rendendo EPS8L1 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici sul movimento cellulare e sulla segnalazione del citoscheletro.
Eps8L1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EPS8L1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EPS8L1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EPS8L1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EPS8L1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.