Epiregulin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420224

Descripción general

El gen **Ereg** del ratón codifica **epiregulina**, un miembro secretado de la familia EGF que interactúa con los receptores **EGFR/ERBB** para modular la señalización **paracrina** y **autocrina**. La epiregulina regula la proliferación, la supervivencia y la migración de células epiteliales y estromales, integrándose con la actividad de las vías **MAPK/ERK** y **PI3K/AKT** y moldeando programas de reparación de heridas y remodelación tisular. La expresión de **Ereg** responde a señales inflamatorias y de lesión, y se estudia con frecuencia en contextos en los que la señalización de la red de EGFR se cruza con microambientes impulsados por citocinas. La desregulación de la señalización de epiregulina se ha vinculado con alteraciones de la función de barrera, remodelación fibrótica y circuitos de señalización oncogénica, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de interacciones tumor–estroma y de señalización de factores de crecimiento asociada a la inflamación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Epiregulin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ereg en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ereg junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ereg tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Epiregulin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ereg para la investigación de la señalización de Epiregulin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ereg críticos para la función de Epiregulin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ereg para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Epiregulin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Epiregulin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ereg. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Epiregulin (m) y el plásmido HDR Epiregulin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ereg para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ereg definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.