EphA10 Plasmide Double Nickase (m): sc-432976-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EphA10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il EphA10 Double Nickase Plasmid (m) e il EphA10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Epha10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EphA10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-432976-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA10 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-432976-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Epha10** codifica **EphA10**, un membro della famiglia dei recettori tirosin-chinasici Eph che media la comunicazione cellula–cellula tramite il legame con le efrine e una segnalazione bidirezionale. La segnalazione associata a EphA10 si interfaccia con vie che regolano il rimodellamento del citoscheletro, l’adesione cellulare e il comportamento migratorio, processi che plasmano la strutturazione dei tessuti e l’organizzazione dei circuiti neurali. Sebbene EphA10 venga spesso descritto come un recettore Eph atipico con attività chinasica alterata, può modulare l’aggregazione dei recettori e le reti di segnalazione a valle che influenzano la differenziazione e l’omeostasi tissutale. Una segnalazione Eph/efrina deregolata è ampiamente associata a un posizionamento cellulare aberrante e a un controllo della crescita alterato, rendendo **Epha10** un bersaglio utile per studi meccanicistici in modelli di sviluppo, immunologia e biologia del cancro.
EphA10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Epha10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Epha10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Epha10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Epha10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.