ENX-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403611-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ENX-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ENX-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ENX-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EZH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ENX-2 Anticorpo (H-4): sc-515817
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ENX-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403611-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENX-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403611-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EZH1 codifica a metiltransferase de histonas do grupo Polycomb ENX-2, um componente catalítico do PRC2 que deposita H3K27me3 para estabelecer e manter programas de repressão transcricional. A ENX-2 contribui para a compactação da cromatina, o controle da identidade celular e a regulação de genes do desenvolvimento, atuando em conjunto com os parceiros centrais do PRC2 para modular redes de transcrição específicas de linhagem. Em células humanas, a atividade de EZH1 interage com a reprogramação epigenética, o controle do ciclo celular e vias de diferenciação, complementando a EZH2 na formação de paisagens de cromatina repressiva. O silenciamento mediado por PRC2/EZH1 desregulado e estados alterados de metilação de H3K27 estão implicados na reprogramação transcricional oncogênica e em outras doenças ligadas à regulação epigenética aberrante.
ENX-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EZH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EZH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EZH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EZH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.