Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
ENSA Plasmide Double Nickase (h): sc-403380-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ENSA Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ENSA Double Nickase Plasmid (h) e il ENSA Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ENSA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ENSA Antibody (L7Q): sc-81883
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ENSA Plasmide Double Nickase (h) | sc-403380-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENSA Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403380-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ENSA (endosulfina alfa) è una piccola fosfoproteina conservata che modula l’attività delle fosfatasi serina/treonina, in particolare inibendo i complessi PP2A-B55. Attraverso questa regolazione, ENSA contribuisce alla tempistica del ciclo cellulare, all’ingresso e all’uscita dalla mitosi e al controllo, dipendente dalla fosforilazione, di nodi di segnalazione che coordinano la proliferazione e le risposte cellulari allo stress. ENSA è inserita in circuiti chinasi–fosfatasi collegati all’attività delle CDK e al controllo dei checkpoint, risultando rilevante per lo studio della fedeltà mitotica e della robustezza dei segnali. Reti di fosforilazione alterate che coinvolgono la regolazione di PP2A sono spesso implicate nella biologia del cancro e delle malattie neurodegenerative, rendendo ENSA un bersaglio utile per l’analisi meccanicistica delle vie di segnalazione.
ENSA Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ENSA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ENSA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ENSA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ENSA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.