Endothelial Lipase Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406307

Panoramica

LIPG codifica la lipasi endoteliale (EL), una fosfolipasi A1 secreta espressa dall’endotelio vascolare che idrolizza i fosfolipidi nelle HDL circolanti e modula il rimodellamento delle lipoproteine e il trasporto del colesterolo. Regolando il catabolismo delle HDL e il turnover dei fosfolipidi, EL influenza l’omeostasi lipidica vascolare e si interseca con la segnalazione infiammatoria nelle cellule endoteliali e nei macrofagi. Alterazioni dell’attività e dell’espressione di LIPG sono state associate a fenotipi legati alla dislipidemia e a processi rilevanti per l’aterosclerosi, inclusi la disfunzione endoteliale e l’infiammazione vascolare guidata dai lipidi. LIPG è inoltre studiato per il suo impatto sulle reti extracellulari di lipasi insieme a LPL e alla lipasi epatica, e per gli effetti sulla produzione di mediatori lipidici.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Endothelial Lipase (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LIPG in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LIPG insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LIPG a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Endothelial Lipase.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LIPG per lo studio della segnalazione di Endothelial Lipase, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni LIPG critici per la funzione di Endothelial Lipase
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di LIPG per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus LIPG. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Endothelial Lipase Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Endothelial Lipase (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia LIPG per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio LIPG definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.