Emx2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403570-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Emx2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Emx2 Double Nickase Plasmid (h) e il Emx2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EMX2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Emx2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403570-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Emx2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403570-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’EMX2 umano codifica il fattore di trascrizione homeobox Emx2, un regolatore chiave del patterning embrionale e della specificazione regionale nel sistema nervoso centrale in sviluppo. Emx2 modula programmi trascrizionali che coordinano neurogenesi, arealizzazione corticale e decisioni di destino cellulare attraverso interazioni con reti di segnalazione dello sviluppo, come le vie WNT/β-catenina e quelle associate a SHH. La sua espressione, finemente controllata, contribuisce alle dinamiche di proliferazione e differenziazione dei progenitori, collegando la disregolazione di EMX2 a malformazioni cerebrali congenite e a traiettorie di sviluppo alterate. In contesti adulti e patologici, l’espressione aberrante di EMX2 è stata studiata in relazione a stati trascrizionali oncogenici e a cambiamenti dell’identità di linea in molteplici tipi di tessuto.
Emx2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EMX2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EMX2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EMX2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EMX2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.